By this author

AN ATTEMPT TO INCREASE THERMOSTABILITY OF THE MUTANT PHOTOSYNTHETIC REACTION CENTER OF Cereibacter sphaeroides USING DISULFIDE BONDS

Issue number 7 from 04.02.2026

Методы сайт-направленного мутагенеза успешно используются в структурно-функциональных исследованиях фотосинтетических реакционных центров (РЦ) пурпурных бактерий. Замечено, что многие аминокислотные замены вблизи кофакторов переноса электрона снижают устойчивость РЦ Cereibacter sphaeroides к температуре и влияют на количество РЦ в мембранах. Ранее нами сообщалось [Selikhanov et al. (2023) Membranes, 25, 154], что внесение межсубъединичных дисульфидных мостиков на периплазматической или цитоплазматической поверхности комплекса способствует увеличению термостабильности РЦ C. sphaeroides. В данной работе предпринята попытка повышения термостабильности мутантного РЦ с замещением Ile M206 на Gln с помощью внесения межсубъединичных дисульфидных связей. Этот РЦ представляет значительный интерес для изучения механизмов ранних процессов переноса электронов в РЦ. Был проведен анализ влияния мутаций на количество РЦ в хроматофорах, и обнаружено, что мутация I(M206)Q приводит к двойному уменьшению содержания РЦ в хроматофорах, внесение дисульфидных связей на цитоплазматической или периплазматической сторонах комплекса снижает количество РЦ в мембранах на треть, тройное замещение I(M206)Q/G(M19)C/T(L214)C – почти в 4 раза, а замещения I(M206)Q/V(M84)C/G(L278)C приводят к нарушению сборки РЦ в мембране. Показано, что внесение межсубъединичной S–S-связи на цитоплазматической поверхности комплекса не оказало существенного влияния на термостабильность РЦ I(M206)Q. Обсуждаются собственные и литературные данные в отношении факторов, влияющих на процессы сборки и обеспечивающих стабильность структуры интегральных мембранных комплексов.

56 0