В данном обзоре рассматриваются современные подходы к изучению репарации двухцепочечных разрывов ДНК (DSB) в клетках млекопитающих с использованием системы CRISPR/Cas9. Благодаря своей универсальности и эффективности эндонуклеаза Cas9 применяется во множестве генетических репортёров. Мы обсуждаем различные репортёры, основанные на флуоресценции, применяемые для мониторинга процесса восстановления. Также среди инновационных подходов на основе Cas9 особое внимание уделяется методам анализа как одиночных, так и множественных DSB, включая подходы DSB-TRIP и ddXR. Эти методы открывают новые возможности для исследования причин структурных перестроек или анализа любых геномных участков. Кроме того, в обзоре рассматривается, чем DSB, индуцированные Cas9, отличаются от DSB, создаваемых другими эндонуклеазами, и как эти особенности могут повлиять на механизмы восстановления ДНК. Понимание этих различий имеет решающее значение для планирования экспериментов, направленных на изучение репарации DSB.
Indexing
Scopus
Crossref
Higher Attestation Commission
At the Ministry of Education and Science of the Russian Federation