By this author

17β-HYDROXYSTEROID DEHYDROGENASE FROM THE FUNGUS : BIOSYNTHESIS IN ACTINOBACTERIAL CELLS AND FUNCTIONAL CHARACTERISTICS

Issue number 9 from 20.03.2026

17β-Гидроксистероиддегидрогеназа (17β-ГСД) – фермент, используемый в биотехнологии получения тестостерона из фитостерина. Гетерологичная 17β-ГСД из гриба катализирует NADPH-зависимое восстановление 17-оксотруппы андростендиона/андростединендиона, образующихся в клетках миколицбактерий в результате присущего им полиферментного процесса окисления алифатической боковой цепи фитостерина, с образованием тестостерона/Δ-дегидротестостерона соответственно. Объектом исследования являлась гетерологичная 17β-ГСД из гриба (17β-ГСД) с 6×His-меткой (6×His-17β-ГСД), синтезированная в клетках актинобактерий . Выделение и очистку рекомбинантного фермента проводили с помощью аффинной хроматографии. Наибольшую активность ферментный препарат 6×His-17β-ГСД проявлял по отношению к андростендиону. Активность 6×His-17β-ГСД зависела от NADPH и проявлялась в интервале pH от 6,0 до 9,0 с оптимумом при pH 7,0. Анализ кинетических характеристик показал, что свойства гетерологичного фермента 6×His-17β-ГСД, синтезированного в клетках , сравнимы с таковыми, полученными для фермента 17β-ГСД, выделенного из гриба , а также для рекомбинантных ферментов 17β-ГСД, синтезированных в клетках и . Результаты расширяют знания о микробных 17β-ГСД и свидетельствуют о перспективности применения рекомбинантных штаммов , экспрессирующих кодон-оптимизированную последовательность кДНК, кодирующую 17β-ГСД из гриба , для получения тестостерона из фитостерина.

21 0